黄精对增强免疫力和缓解体力疲劳功能试验研究报告

　　【摘要】目的研究黄精对运动小鼠增强免疫力和缓解体力疲劳作用。方法采用小鼠灌胃，进行黄精增强免疫力和缓解体力疲劳试验。结果增强免疫力试验中，中、高剂量组能提高小鼠迟发型变态反应(P<0.01)，高剂量组能提高小鼠血清溶血素试验中抗体积数(P<0.05)，中、高剂量组能提高碳廓清能力和巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力(P<0.05);缓解体力疲劳功能试验中高剂量组(1.5g/kg)能显著延长小鼠的力竭游泳时间(P<0.05)，显著增加肝糖原储备(P<0.05);中(0.5g/kg·bw)、高剂量组(1.5g/kg·bw)能显著降低小鼠血清尿素含量(P<0.05，P<0.01)，显著减少血乳酸曲线下面积(P<0.05，P<0.01)。表明黄精具有缓解体力疲劳作用。结论黄精具有增强免疫力和缓解体力疲劳功能。

　　关键词：黄精;体力疲劳;免疫

　　黄精(Polygonatumsibiricum)药用历史悠久，是常用的药食同源植物。距今已有2000多年历史，中医古方黄精地黄丸、二精丸等至今仍在应用。《神农本草经》中记载:“黄精，味甘、平、无毒，主补中益气，除风湿，安五脏，久服轻身，延年不饥”。现代研究表明，黄精中含有多糖、黄酮、低聚糖、生物碱、甾体皂苷、氨基酸等多种化学成分[1]，具有降血糖、抗氧化、增强免疫力、抗菌抗炎等多种药理作用[2-5]。黄精也是保健食品原料，黄精作为药食同源物品正被广泛用于保健食品的开发中，截止目前，以黄精为主要原料申报的保健食品1000多种，申报的保健功能主要集中在增强免疫力、缓解体力疲劳、辅助降血糖等。随着黄精经济价值和社会效益日渐突出，在保健食品领域有着巨大的开发潜力和广阔的市场前景。

　　本试验采用小鼠灌胃给药，设三个剂量组和阴性对照组，进行了黄精的增强免疫力和缓解体力疲劳试验，为开发具有增强免疫力和缓解体力疲劳功能的黄精类产品提供理论依据。

　　1仪器与材料

　　1.1动物SPF级昆明种小鼠，雄性，饲养环境为屏障级。

　　1.2受试物取一定量的药材，10倍量水煎煮3次，每次2h，合并三次滤液浓缩成所需浓度。

　　1.3仪器与试剂动物天平、电子天平、铅皮、电动玻璃匀浆器、低速离心机、分光光度计、游泳箱、恒温水浴锅、玻璃器皿、一次性定量取血管、试管、离心管、微量加样器、手术器械。测定尿素、肝糖原和血乳酸的试剂盒均由南京建成生物公司提供。紫外分光光度计、酶联免疫检测仪、光学显微镜、血细胞计数器、24孔和96孔平底细胞培养板、96孔U型底细胞培养板。

　　1.4统计学处理采用SPSS19.0软件进行统计分析，计量资料以(x±s)表示。对所得数据进行完全随机设计单因素方差分析(不符合应用条件时需进行数据转换)，进一步两两比较采用LSD-t法。Pdddddd<0.05为差异有统计学意义。

　　2方法

　　2.1增强免疫力试验[6]免疫功能检测实验选取雄性小鼠200只，分为4个免疫大组，每免疫大组又分为水对照组、低、中、高剂量组，每组各10只。免疫一组用于迟发型变态反应(DTH)实验、血清溶血素测定、抗体生成细胞数测定;免疫二组用于小鼠碳廓清实验;免疫三组用于小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验;免疫四组用于小鼠淋巴细胞转化实验和小鼠NK细胞活性测定。实验环境温度22℃±2℃，相对湿度50%±10%。

　　高、中、低剂量组给药剂量分别为生药1.5g/kg、0.5g/kg、0.25g/kg(分别相当于人体推荐剂量的30、10和5倍)，对照组给予等体积纯化水。各组灌胃给药，每日1次，连续30d，灌胃体积均为0.1mL/10g体重。连续灌胃30d后测各项指标，包括细胞免疫功能指标、体液免疫功能指标、单核-巨噬细胞吞噬指标及NK细胞活性测定。

　　2.2缓解体力疲劳试验选取检疫合格小鼠160只，将小鼠随机分为4大组，按体重随机分为阴性对照组和高、中、低剂量组，每组10只小鼠。高、中、低剂量同增强免疫力试验，经口每日一次灌胃给予小鼠受试物，灌胃体积按20mL/kg.bw，阴性对照组以等体积的纯化水代替受试物溶液灌胃，连续给予30d后测定缓解体力疲劳功能的各项指标。包括负重游泳时间、血清尿素、肝糖原、血乳酸。

　　3结果

　　3.1增强免疫力试验

　　3.1.1对小鼠体重、脏器体重比值的影响

　　小鼠初始体重、灌胃30天后体重增长值均数在各组间差异无统计学意义(P>0.05)。小鼠脾脏体重比值均数和胸腺体重比值均数在各组间比较，差异亦无统计学意义(P>0.05)。

　　3.1.2各剂量组小鼠细胞免疫功能指标比较

　　小鼠迟发型变态反应结果显示，中、高剂量组小鼠足跖肿胀度显著高于对照组(P<0.01)，表明受试物可提高小鼠迟发型变态反应能力。

　　ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验结果显示，各组间的淋巴细胞增殖能力均数差异无统计学意义(P>0.05)。表明受试物对小鼠淋巴细胞转化能力无影响。见表2。

　　3.1.3各剂量组小鼠体液免疫功能指标比较

　　小鼠抗体生成细胞数测定表明各组间抗体生成细胞数均数差异无统计学意义(P>0.05)。小鼠血清溶血素实验中，高剂量组与对照组间比较，差异有统计学意义(P<0.05)。

　　3.1.4小鼠单核巨噬细胞吞噬功能影响采用小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力测定实验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力测定实验。前者中、高剂量组吞噬指数1与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);后者中、高剂量组吞噬指数2、吞噬率平方根反正弦转换值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。

　　3.1.5小鼠NK细胞活性改变各组间小鼠NK细胞活性差异无统计学意义(P>0.05)。表明受试物对小鼠NK细胞活性无影响。

　　3.2抗疲劳试验

　　3.2.1各组动物的体重在试验前实验中及结束时均无统计学意义(P>0.05)。表明对小鼠体重无不良影响。

　　3.2.2小鼠5%负重游泳试验与阴性对照组比较，高剂量组小鼠负重游泳时间显著性延长，有统计学意义(P<0.05)。

　　3.2.3小鼠力竭运动后血清中尿素/肝糖原测定试验

　　中、高剂量组小鼠血清尿素含量显著性低于对照组(P<0.05，P<0.01);高剂量组小鼠肝糖原含量显著性高于对照组(P<0.05)。

　　3.2.4小鼠力竭运动后血乳酸的影响测定试验

　　经口给予小鼠不同剂量样品后，游泳前、游泳后休息0min、休息20min时各组小鼠血乳酸含量均无显著性差异(P>0.05)。中、高剂量组小鼠三个时间点血乳酸曲线下面积与对照组比有显著性差异(P<0.05，P<0.01)。

　　4讨论

　　随着社会节奏的加快，社会竞争日益激烈，免疫低下及疲劳已成为威胁人类健康的重要因素。因此具有增强免疫力及缓解体力疲劳的保健食品具有很好的市场前景。黄精作为药食同源中药之一，有悠久的食用历史，在中国应用已有千年历史，被道家誉为养生圣药，常用来延年益寿，疗诸病。本研究依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》2003年版中缓解体力疲劳及增强免疫力试验方法，选用小鼠进行试验，研究了黄精的增强免疫力和缓解体力疲劳作用。

　　经口灌胃给予小鼠0.25、0.5、1.5g/kg·bw剂量的黄精30d后，与对照组比较，中、高剂量组能提高小鼠迟发型变态反应;高剂量组能提高小鼠血清溶血素实验值抗体积数;中、高剂量组能提高碳廓清能力和巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力(P<0.05);对小鼠体重增长、胸腺/体重比值、脾脏/体重比值无影响;对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化、小鼠抗体生成、小鼠NK细胞活性均无统计学意义(P>0.05)。根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中增强免疫力功能的判断标准，本实验中细胞免疫功能和单核巨噬细胞功能结果均为阳性，表明黄精具有增强免疫力的功能。

　　经过30d连续灌胃黄精，高剂量组(1.5g/kg)能显著延长小鼠的力竭游泳时间(P<0.05)，显著增加肝糖原储备(P<0.05);中(0.5g/kg·bw)、高剂量组(1.5g/kg·bw)能显著降低小鼠血清尿素含量(P<0.05，P<0.01)，显著减少血乳酸曲线下面积(P<0.05，P<0.01)。表明黄精具有缓解体力疲劳作用。

　　参考文献

　　[1]李亚霖，周芳，曾婷，等.药用黄精化学成分与活性研究进展[J].中医药导报，2019，25(05):86-89.

　　[2]杨胜坤.黄精多糖对糖尿病大鼠血糖水平的影响[J].中国实验方剂学杂志，2011，17(16):297.

　　[3]方欢乐，李晓明，李秋全，等.黄精多糖的提取及抗氧化作用的研究[J].生物化工，2018，(03):11-12，15.

　　[4]顾晓龙，罗明友.黄精对小鼠免疫调节作用的影响研究[J].四川畜牧兽医，2019，(04):24-26.

　　[5]郑春艳，汪好芬，张庭廷.黄精多糖的抑菌和抗炎作用研究[J].安徽师范大学学报(自然科学版)，2010，33(03):272-275.

　　作者：张新日，李国良，宋一凡，张梦欣

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